목차

전기영동 최신 프로토콜

I장 핵산전기영동

1 Agarose 겔 전기영동
기본조작에서 고속영동 및 다검체 영동의 신기술까지 14
I. 샘플조제법과 겔의 제작방법 18
II. 영동과 검출 21

2 핵산 polyacrylamide 겔 전기영동
미니 겔 및 건조 겔을 이용한 신속하고 고분해능적인 핵산분리 26
I. 샘플 조제법 29 II. Polyacrylamide 겔 제작법 30
III. 영동 32 IV. 검출 33

II장 Hybridization에 의한 핵산 검출
1 Southern blot의 제작 35
2 Probe의 표식과 검출 41
I. HRP 직접표식법에 의한 Southern blotting의 화학발광검출 43
II. AP 직접표식법에 의한 Northern blotting의 화학발광검출 46

III장 단백질 전기영동

1 Leammli 법을 이용한 간편한 SDS polyacrylamide 전기영동 50
2 등전점 전기영동
양성담체, 고정화 pH 구배 (Immobilized pH gradient) 겔을 이용한 등전점 전기영동 59
I. 샘플 조제 및 겔 제작에 영향을 미치는 파라미터 62
II. Carrier Ampholyte Precast 겔 (Ampholine PAG plate)을 이용한 등전점 전기영동 64
III. 건조 겔 (CleanGel IEF)을 이용한 등전점 전기영동 67
IV. Immobiline DryPlate를 이용한 등전점 전기영동 69
3 단백질의 이차원 전기영동 고정화 pH 구배 겔을 이용한 이차원 전기영동 72
I. 여러 종류의 샘플 조제법 73
II. 조제한 단백질의 정량 76
III. 1차원 째 등전점 전기영동 77
IV. 2차원 째 SDS 전기영동 80

IV장 단백질 염색·검출방법
1 색소염색 (Coomassie Brilliant Blue, Amido Black 10B)
보다 고감도인 범용 염색법 85
I. SDS-PAGE 후의 CBB 염색 87
II. 등전점 전기영동 후의 CBB 염색 89
2 은 염색 단백질 각종 전기영동 후의 상세한 프로토콜 92
I. SDS-PAGE 후의 은 염색 93
II. 등전점 전기영동 후의 은 염색 96

3 Negative 염색 100
SDS-PAGE 후의 Negative 염색 101
4 최신 형광색소를 이용한 고감도 형광염색 103
I. SDS-PAGE 후의 SYPRO Orange에 의한 염색 104
II. SDS-PAGE 후의 SYPRO Ruby에 의한 염색 106

V장 응용해석법
1 DNA 단편해석
a DNA 단편해석이란 109
b 미니 겔을 이용한 PCR-SSCP 법의 효율적 조건 검토 111
실험결과 예와 최적영동조건 검토
c 형광 Auto Sequencer를 이용한 PCR-SSCP 해석 119
d EMD 해석 변이해석의 신기술 126
2 형광 DNA Sequencing
a 형광 DNA Sequencing 이란 130
b 초박층 매트릭스를 이용한 고속 Sequencing 132
c Capillary를 이용한 고속 sequencing 해석 138
3 Western blotting 고분해도 × 고특이성의 단백질 동정법 142
I. 일반적인 Western blotting의 조작 146
II. 최적 항체 농도 결정을 위한 참고 프로토콜 149
III. 항체와 검출법의 종류 150

VI장 해석방법
1 화상입력의 최신 동향 153
2 일차원 전기영동의 해석 최신 소프트웨어에 의한 실험 데이터의 통합관리 157
I. 일차원 전기영동 해석 소프트웨어 157
II. 해석순서 159
III. 데이터베이스 작성 166
3 이차원 전기영동의 해석
프로테움 해석을 목표로 한 화상해석에서 데이터베이스의 구축까지 169
I. 이차원 전기영동이 가진 정보와 해석항목 170
II. 이차원 전기영동 화상해석 소프트웨어 171
III. 해석순서 172
IV. 화상표시 176
V. 이차원 전기영동 데이터의 정리, 보존 177
약어일람 179
찾아보기 180